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膠體金快速檢測卡操作過程中的常見問題

作者: vch12690211
發布于: 2023-08-22 10:59
閱讀: 210

膠體金檢測卡又被稱為膠體金檢測試紙,是一種不需要專業技能和昂貴復雜的儀器設備即可實現對抗原、抗體和半抗原等各種分析物的定量和半定量檢測的快速檢測產品。

膠體金卡的組成:

膠體金檢測卡由樣品墊、結合墊、層析膜,吸水紙和塑料卡殼五個單元組成。樣品墊為經過處理的纖維膜或者玻璃棉,作用是快速吸收待檢樣品溶液,使其通過虹吸作用向結合墊側向流動。結合墊同樣是纖維膜或者玻璃棉,主要用于吸附有標記的生物活性材料(如金標抗體),它可與待測樣品溶液中的檢測靶標結合形成肉樣可見的免疫復合物。層析膜為纖維膜或者尼龍膜,連接在結合墊和吸水墊之間,其上固定有兩條或者多條不同活性材料,形成“檢測線T線“和”控制線C線“印跡,主要用于與攔截帶標記的免疫復合物,顯示檢測結果。塑料卡殼是適用于將這些組件包裝起來的外殼,方便檢測同時具有固定卡條。

膠體金檢測卡的反應原理:

檢測卡是基于膜免疫層析原理建立起來的快速檢測產品。當將制備好的待測樣品溶液滴加到檢測卡滴液孔(s孔),樣品溶液在虹吸作用下由測試端向手柄端側向流動,待測靶標在側向流動過程中會與結合墊上的生物活性物質(抗體、抗原或者生物大分子)先發生特異性結合反應,形成復合物,在側向流動中在與檢測線和質控線上的生物活性物質發生結合反應固定起來,形成肉眼可見的檢測線和質控線,進而根據檢測線和質控線的顯色情況判斷結果。 

下面我們介紹下膠體金快速檢測卡操作過程中的常見問題

常見問題/異常情況

原因分析

建議處理方案

樣品層析速度異常慢無樣本跑動(在檢測窗內不見有液體在膜上流動)

  1. 加樣量太少(一般要求加樣為40-80ul)。
  2. 樣本過于粘稠或有沉淀物(如血塊)。
  3. 該測試條已受潮失效。
  1. 增加加液量或滴加少量輔助液
  2. 滴加少理輔助液,對樣本進行預處理以去除沉淀物(血清/血漿離心后使用,全血重新取樣)
  3. 更換新測試條重新檢測,測試條盡量現拆現用

檢測窗內出現紅/紫色堅線

該試紙條受輕微的物理損傷

該情況不影響檢測結果,可在背景清晰后于規定時間內讀取結果,或更換新測試條重新檢測

有大量全血溢出,NC膜表面偏紅,影響結果判讀

  1. 該測試條NC膜嚴重受損(機械損傷)或斷裂
  2. 使用已溶血的全血標本
  1. 更換新測試條重新檢測。
  2. 盡量使用新鮮全血進行檢測

層析時無紅/紫紅色背景出現

該測試條已受潮失效

更換新測試條重新檢測

漏檢率偏高(假陰性)

  1. 檢測時間太短
  2. 加樣量太少,輔助液滴加過量,樣本被稀釋
  3. 樣本中被檢物濃度太低
  4. 個別樣本中含有較為特殊物質或亞型
  5. 該測試條受潮,活性下降或失活
  1. 按說明書要求正確判讀(建議對于較弱陽性或陰性標本至少10-15分鐘判讀結果
  2. 按說明書要求正確加樣或輔助液
  3. 采用其它檢測方法進行確認
  4. 更換新測試條重新檢測,測試條盡量現拆現用

檢測線/對照線不完整

該試劑條有輕微的物理損傷

該情況不影響檢測結果,也可更換新測試條重新檢測

檢測線與對照線之間出現灰暗的陰影

測試條NC膜表面的透明膠帶邊沿引起的視覺差異

該情況不影響檢測結果,可在規定時間內讀取結果

檢測后出現假陽性結果

  1. 該測試條靈敏度偏高
  2. 該樣本含特殊干擾物或已被污染
  3. 在規定的時間后判讀結果
  1. 提前判讀結果或更換新測試 條重新檢測
  2. 用其他檢測方法確診檢測結果,確保樣本不受污染
  3. 按說明書要求正確判讀結果,30分名鐘后檢測結果可能不準確

呈色檢測線比對照線明顯深黑

強陽性結果

正常情況,不影響檢測結果

檢測線或對照相館線附近出現白斑或白色條帶

個別情況,NC膜自身質量原因,生產無法控制

該情況一般不影響檢測結果

同一樣本血清檢出時間快于全血標本

相同體積的血清標本含受檢物的量要高于全血標本

正常情況,不影響檢測結果

NC膜表面顏色較深(紫紅甚至偏紫)

測試剛開始該現象明顯,3-5分鐘后顏色就會明顯褪去屬正常現象

正常情況,不影響檢測結果

 

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