呋喃西林代謝物快速檢測卡(魚蝦、水產(chǎn)品)
呋喃西林屬于硝基呋喃類抗菌藥物,可用于預(yù)防和治療細(xì)菌感染引起的腸道感染疾病,因其價格低、效果好、不易產(chǎn)生抗藥性,曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用于禽類、畜類和水產(chǎn)類動物的養(yǎng)殖中。呋喃西林藥物代謝快速,在生物體內(nèi)消除時間短,然后其代謝物(氨基脲)會在生物體內(nèi)與細(xì)胞膜蛋白結(jié)合形成穩(wěn)定的結(jié)合態(tài),且會長期存在。
呋喃西林、呋喃唑酮及其代謝物等具有致突變作用,雖然有關(guān)呋喃咜酮、呋喃妥因及其代謝物等的毒性數(shù)據(jù)尚不充分,但出于安全性考慮,歐盟于1995年禁止食用動物中使用硝基呋喃類抗生素。2002年我國農(nóng)業(yè)部公告的“獸藥及其它化合物清單”中明確硝基呋喃類藥物禁止在所有食品動物中使用;2019年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部修定的“食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單”(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告 第250號)中依舊將硝基呋喃類藥物作為禁用藥品。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的呋喃西林代謝物快速檢測卡應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測組織樣本中呋喃西林代謝物殘留。整個檢測過程需要2個小時,適用于各類企業(yè)及檢測機(jī)構(gòu)。
樣本前處理
1、取切碎的一定量的去脂肪水產(chǎn)品組織樣品,用均質(zhì)機(jī)均質(zhì);
2、稱取約5 g 均質(zhì)物于50 mL 離心管中;
3、依次加入5 mL純凈水,0.5 ml 2.5M提取劑1,0.2 mL樣本衍生化試劑,充分振蕩混勻3 min;
4、置于60℃水域條件下孵育1小時;
5、取出后加入5 mL 0.1M磷酸氫二鉀,0.4 mL 2.5M氫氧化鈉,6 mL乙酸乙酯,充分混合3 min,室溫下(20-25℃) 4000 轉(zhuǎn)/分鐘 離心5 分鐘;
6、用移液器移取 3 mL 上層溶液于5 mL離心管中,65℃下氮(空)氣吹干,得固體殘渣;
7向吹干的離心管中先加入0.5 mL正己烷,加蓋振蕩混合1 min;再加入0.3 mL專用復(fù)溶液,充分混勻,4000 r/min離心1 min;
8取下層液體備用。
樣品檢測
1、從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面;
2、吸取下層液體120μL于金標(biāo)微孔中,吹打混勻(至少吹打10次),直至金標(biāo)微孔內(nèi)紅色物質(zhì)完全溶解,等待5鐘,吸取全部液體滴加到檢測卡的加樣孔中;
3、 加樣后開始計時,室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果,超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。 7
結(jié)果判斷
陰性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)顯色比C線深或一樣深,表示樣品中呋喃西林代謝物濃度低于檢測限或不含呋喃西林代謝物。
陽性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)不顯色或顯色比C線明顯淺,表示樣品中呋喃西林代謝物濃度高于檢測限。
失效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
注意事項
1、 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2 、檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
3 、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。