氯霉素膠體金快速檢測卡性能參數(shù)
氯霉素是一種高效廣譜的抗生素,對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有較好的抑制作用。人體過量攝入氯霉素可能引起人肝臟和骨髓造血機能的損害,導致再生障礙性貧血和血小板減少、肝損傷等健康危害。《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑品種名單(第五批)》(整頓辦函〔2011〕1號)中規(guī)定,氯霉素在肉制品中不得檢出。肉制品中檢出氯霉素的原因,可能是生產(chǎn)企業(yè)采購了含有氯霉素的原料肉;也可能是生產(chǎn)過程中衛(wèi)生控制和出廠檢驗不嚴格。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的氯霉素膠體金快速檢測卡應用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測組織樣本中氯霉素(Chloramphenicol,CAP)。樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的氯霉素與金標抗體相結(jié)合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上氯霉素偶聯(lián)物結(jié)合。當樣本溶液中的氯霉素含量大于檢測限時檢測線不顯色,結(jié)果為陽性;當樣本溶液中氯霉素含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色(T線與C線一致或更深),結(jié)果為陰性。
樣本前處理:
1、取切碎的一定量的去脂肪畜產(chǎn)品組織樣品,用均質(zhì)機均質(zhì);
2、稱取約2 g 均質(zhì)物于15 mL 離心管中;
3、依次加入2 mL純凈水和2 mL乙酸乙酯,劇烈振蕩混勻;
4、室溫下(20-25℃) 4000 轉(zhuǎn)/分鐘 離心5 分鐘;
5、用移液器移取 1 mL 上清液于10 mL離心管中,65℃下氮(空)氣吹干,得固體殘渣;
6、先加入1 mL正己烷,振蕩混合均勻;再加入0.3 mL樣本復溶液,混合均勻后靜置,液體明顯分層,取下層液體備用。
樣品檢測:
1、從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面;
2、吸取下層液體120μL于金標微孔中,吹打混勻(至少吹打10次),直至金標微孔內(nèi)紅色物質(zhì)完全溶解,等待2分鐘,吸取全部液體滴加到檢測卡的加樣孔中;
3、 加樣后開始計時,室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果,超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
結(jié)果判斷:
陰性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)顯色。
陽性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)不顯色。
失效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
注意事項:
1、過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2、 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
3 、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。